ICH指导原则

国际人用药品技术要求协调委员会( ICH ) 将监管机构和制药行业聚集在一起讨论药品开发，注册科学和技术，旨在简化流程与组织结构，以加速医药开发管制流程，缩短病患采用新医药所需要的时间。2017年ICH会议通过了中国国家食品药品监督管理总局的申请，总局成为国际人用药品注册技术协调会正式成员。目前，ICH指导原则已成为国际通用的指导原则。

ICH指导原则分为四类，Q：质量指导原则；S : 安全性指导原则；E : 有效性指导原则；M : 多学科指导原则，其中章节对细胞库的质量有如下规定：

一、细胞基质的来源、历史和产生

为确保制品的质量和安全性，需提供一份支持性文件，记载生产生物技术产品及生物制品的细胞基质的历史，还应记载它们母细胞系的历史，以便将细胞基质在研究和开发阶段所发生的事件与生产制品所用的特定细胞基质相联系来全面评估其风险。

1、细胞的起源、来源和历史

应说明所用细胞基质的细胞来源(实验室制备或来源于菌种库)，引证科学文献上的相关参考资料。直接从实验室获得的资料是首选的，如果没有这些资料，也可以利用文献。

对于动物来源细胞系，应提供物种、品系、饲养条件、组织或器官的起源、地理位置、年龄和性别、致病因子的检查结果以及原供体的一般生理状况。

应记录细胞的培养历史，包括最初分离细胞的方法、细胞体外培养的方法以及建立细胞系的方法(例如，任何物理、化学或生物学的方法，或附加的核苷酸序列)。还应提供所有对基因操作和筛选的描述、细胞内源性和外源性因子的鉴别、特性和检测结果等资料。

关于细胞基质的产生，应提供详细的制备过程中接触的外源因子。应提供培养基的组分，特别是提供关于人或动物来源的物质，如血清、酶、水解产物或其他活细胞方面的资料。提供的资料还应包括来源、制备和质控方法、检测结果和质量保证。还应提供有关上述方面的文献。这些资料将用于分析外源因子来源的可能途径，并作为制品风险评估的一部分。

二、细胞库

用连续传代培养的细胞生产生物技术产品及生物制品的最大优点是每批产品都有一个经检定过的共同起源。二级细胞库即主细胞库（MCB）和工作细胞库(WCB)。WCB来源于一支或多支MCB。WCB是直接用于生产的细胞。生产商有责任对每个细胞库进行检验，以确保其质量。

§   生产商应说明所用建库系统的类型、细胞库的大小、所用的容器(瓶子、安顿或其他合适的器皿)和密闭系统，用于制备细胞库的方法包括所用的冻存剂、培养基以及细胞保存和贮藏的条件。

§   生产商应阐明避免微生物污染和避免被实验室中其他类型细胞交叉污染的方法，还应介绍可追踪细胞库容器的方法，包括记录系统，以及能经受保存、贮藏和从贮藏中复苏时容器的标签不会丢失。

生产商应说明细胞建库的过程，应保证细胞库的均一性，还应使细胞保持一定的生存能力，来满足生产及产品一致性的要求。

三、细胞库鉴定和检测

细胞库检测包括以下内容：

1、鉴别试验

应采用合适的试验证明建库的细胞就是它本身。鉴别试验可利用细胞的表型或遗传型特征，但不必作所有的试验。通常对MCB作鉴别试验。

对于人或动物细胞，可采用形态学分析与其他试验相结合的方法。在大多数情况下，同工酶分析足以确证人或动物细胞库的种属来源；依据细胞系的历史情况，可采用其他合适的试验。用染色体条带分析或种属特异性抗血清的方法可以用于鉴定种族来源，或者用染色体细胞遗传学来检测独特的标记染色体，或用DNA分析来检测基因组多态性(例如STR)。

2、纯度检测

评估MCB和WCB的生物学纯度，即游离的外源微生物和外源细胞污染，是细胞开发和建库的关键部分。在设计和进行这些试验时，应考虑选择性试剂和抗生素对检测外源微生物污染的影响，主要检测细菌、真菌、支原体的存在。

对于细胞基质中可能污染病毒的检测，应根据细胞系的培养史，通过筛选和相关的特异性试验，选用可检测广谱病毒的方法。

3、细胞基质的稳定性

细胞鉴定的另一个目的是考察细胞在生产中的适用性。细胞基质稳定性主要应考虑两个方面进行，即生产产品的一致性和贮存在规定条件下的细胞能否维持其生产能力。

评估培养期间的稳定性，至少应考察两个时间点。一个时间点是采用最少传代数的细胞，另一个时间点是申请上市的生产中达到或超过细胞体外传代限度的细胞。细胞基质稳定性的验证通常在每个产品上市申请时进行一次。

4、细胞核学和致瘤性试验

根据细胞类型、产品的性质以及生产工艺，决定是否有必要采用胞核学和致瘤性试验来评价二倍体细胞系的安全性或鉴定一个新的细胞系。采用广泛的分析方法测定非整倍染色体细胞的相对丰度未必有用。啮齿类动物细胞系或已知为非二倍体的新细胞系不需要作细胞核学测定，因细胞遗传学分析足以评估细胞基质的特性或纯度。对文献已记载具有致瘤性的细胞不需重复进行致瘤性试验。