质粒提取的得率和质量与很多因素有关,如宿主菌的种类和培养条件、细菌细胞的裂解、质粒拷贝数、质粒的稳定性、抗生素、吸附膜的吸附能力、提取操作的熟练程度等等。
ICH指导原则分为四类,Q:质量指导原则;S : 安全性指导原则;E : 有效性指导原则;M : 多学科指导原则
大肠杆菌培养:将接种完成的培养基放入恒温培养箱或恒温振荡培养箱内进行培养,即可得到所需的大肠杆菌菌落或种子液。
普通PCR所用的一对引物中有一个引物加多了,为正常的三倍只要引物特异性比较好,那么不会产生大的影响。如果恰巧是加多的这条引物不是很特异的话,也许会扩出来非特异带。
蛋白质的盐析法:中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析。
用Trizol法沉淀RNA容易有一些杂质的。部分色素是会和RNA一起沉下来。这种情况可以用75%冷的乙醇多洗几遍。对后续qRT-PCR多数情况下没什么影响。
发酵染菌:指在发酵过程中生产菌以外的其他微生物侵入了发酵系统,从而使发酵过程失去真正意义上的纯种培养。
在“贴壁细胞传代”中,培养基中的血清会抑制胰酶的活性,影响消化的效果,所以必须要PBS 的清洗。
标准溶液的配制及标定如无特殊规定,应严格按照USP25或CP2000规定的方法操作。
光滑型菌落(S型菌落):菌落表面光滑、湿润、边缘整齐,新分离的细菌大多呈光滑型菌落。