原代细胞由于转染效率低这个问题，应用受到了限制。自从腺病毒诞生后，因为其超强的感染能力，克服了原代细胞难感染的问题，使得原代细胞的使用变得更加简单。由于细胞实验后，很多时候需要做到动物体内，由于原代细胞有体内细胞的特点，为了细胞实验和动物体内实验的结果更加趋向一致性，因此用原代细胞来进行细胞实验更值得考虑。

将所需的培养基，胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上，瓶口对准酒精灯，且放在距离酒精灯最近的位置，瓶盖置于酒精灯的另一侧。

生长在固体培养基上的霉菌菌丝可分为三部分：①营养菌丝：深入的培养基内，吸收营养物质的菌丝；②气生菌丝：营养菌丝向空中生长的菌丝；③繁殖菌丝：部分气生菌丝发育到一定阶段，分化为繁殖菌丝，产生孢子。

严格进行动物皮肤消毒，使用三套器械取材。新生动物皮肤先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。
 

微生物实验室及无菌操作台开紫外灯灭菌1小时，关闭后至少半小时才进入无菌室，我们一般1小时后才进去。因为紫外灯照射后有残留。

革兰染色法是细菌学中最广泛使用的一种鉴别染色法。1884 年 由丹麦医师 Gram 创立。方法是先将细菌用结晶紫染色，加媒染剂（增加染料和 细胞的亲和力）后，用脱色剂（酒精或丙酮）脱色，再用复染剂染色。如果细菌 不被脱色而保存原染液颜色者为革兰阳性菌(G＋)；如被脱色，而染上复染液的颜 色者为革兰阴性菌(G-)。此染色法可将所有具有细胞壁的细菌分为两大类：革兰 阳性菌和革兰阴性菌。

尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因，样品间的交叉污染也是原因之一。因此，不仅要在进行扩增反应是谨慎认真，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意

荧光定量PCR是实验室中出镜率非常高的一种技术手段。它通过在PCR体系中添加荧光基团来显示DNA产物的累积情况，从而达到对PCR过程进行实时监控的目的。并且可以通过数据分析计算出起始模板量，这就是“荧光定量”中“定量”一词的来源。

RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里，培养单细胞及小细胞团的组织培养系统